21세기에 들어 다양한 학문이 융·복합되어 새로운 통섭의 학문으로 발전하고 있어 융합학문의 기초를 다지는 것이 우선되어야 한다. 현재 우리 사회에서 가장 영향력을 미치는 학문분야는 인류의 생명과 건강을 다루는 생명과학이라고 해도 과언이 아닐 것이다. 다양한 생명체의 생명원리를 이용하여 인류의 복지와 생명유지를 위한 생명 과학기술이 다양한 학문분야와 연계되어 발전하고 있다. 이와 같이 첨단의 생명과학을 이해하고 발전시키기 위해서는 생명과학의 기초가 되는 생명체의 생명현상을 생화학 및 분자생물학의 관점에서 이해하고, 이를 연구할 수 있는 실험적 기반과 토대를 갖추어야 한다. 본 실험서에서는 생명체의 생명현상을 생화학 및 분자생물학의 관점에서 직접적으로 이해하기 위하여 생명체의 가장 기본 단위인 원핵세포(원핵 미생물) 유전자를 대상으로 한 유전자 조작 실험과 유전자의 클로닝을 다루고, 유전자 클로닝을 통하여 만들어진 재조합 단백질의 생화학적 특성실험을 다루고자 한다. 본 실험서를 통하여 생명과학과 관련된 기초 및 응용 실험능력을 배양하고 바이오 및 발효융합전문인력의 양성을 목표로 한다.
Contents
머리말
01 생화학 및 분자생물학 실험의 개요
1. 실험 및 실험실에서의 주의사항 08
2. 실험보고서 작성 10
02 생화학 및 분자생물학 실험: 원핵세포 유전자 클로닝
실험 1. 배지 만들기 및 원핵 미생물의 배양 15
실험 2. 그람음성균으로부터 chromosomal DNA의 분리 및 정제 20
실험 3. 그람양성균으로부터 chromosomal DNA의 분리 및 정제 25
실험 4. 유전자 검출법 : Agarose gel 전기영동 29
실험 5. DNA의 함량 및 순도 측정 37
실험 6. DNA 제한효소를 이용한 DNA의 절단(digestion) 43
실험 7. Ligation 및 형질전환 53
실험 8. 형질전환체의 확인 61
실험 9. PCR을 이용한 원핵세포 유전자 클로닝 방법 67
실험 10. 재조합 대장균으로부터 재조합 플라스미드 DNA의 분리 75
03 재조합 단백질 실험: 단백질(효소)의 정제 및 특성
실험 1. 유전자클로닝을 통한 재조합 단백질의 생산 83
실험 2. 재조합 단백질 정량 및 SDS-PAGE를 통한 분석법 88
실험 3. 재조합 단백질 정제 100
실험 4. 재조합 단백질 특성: β-galactosidase 활성 측정 및 특성 연구 105